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黄狗肾饮片的提取工艺研究-康复护理学论文范文

鞭类中药饮片的服用方法主要包括研粉吞服、煮食和泡酒内服。谭氏等[5]研究结果表明,狗鞭(黄狗肾)饮片匀浆后的混悬液对肾阳虚型动物有不同程度的壮阳作用;文献报道其主要含雄性激素、蛋白质、维生素E、脂肪和有机纤维等成分[6]。乌鳖颗粒中黄狗肾不同乙醇浓度提取工
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河北时时彩十一选五开奖结果 www.fv80v.com.cn   鞭类中药饮片的服用方法主要包括研粉吞服、煮食和泡酒内服。谭氏等[5]研究结果表明,狗鞭(黄狗肾)饮片匀浆后的混悬液对肾阳虚型动物有不同程度的壮阳作用;文献报道其主要含雄性激素、蛋白质、维生素E、脂肪和有机纤维等成分[6]。乌鳖颗粒中黄狗肾不同乙醇浓度提取工艺(工艺A和工艺B)的提取物均可使卵巢摘除大鼠血清E2水平增高;此外,用95%乙醇提取工艺(工艺A)制备的提取物还具有较好的提高大鼠雌激素活性,促进子宫、卵巢生长的作用,这与乌鳖颗粒治疗卵巢功能早衰目的一致。综合上述分析,方中黄狗肾饮片应用95%乙醇提取。

  1 实验材料

  1.1 动物

  雌性SD大鼠,体重120~140 g,由浙江大学实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(浙)2008-0033。ICR小鼠,体重14~18 g,由扬州大学实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(苏) 2007-0001。

  1.2 仪器

  SP-756PC型紫外可见分光光度计;LDZ5-2型离心机;r-911全自动放免计数仪;FA1004电子分析天平。

  1.3 药物与试剂

  六味地黄丸?;乒飞黾胺街幸河诮帐?a href='//www.fv80v.com.cn/html/Medicine/' target='_blank'>医药公司,经鉴定符合相关要求。红四氮唑(TTC,上海试剂三厂,批号961115);四氯乙烯;无水乙醇。雌二醇(E2)试剂盒;促卵泡激素(FSH)试剂盒;黄体生成素(LH)试剂盒。

  2 方法与结果

  2.1 供试液制备方法

  工艺A提取液:按处方比例称取饮片,黄狗肾加10倍量95%乙醇回流提取2次,每次1 h,滤过,药液与药渣备用;枸杞子、茯苓加10倍量水煎煮2次,每次1 h,滤过,合并滤液,浓缩至相对密度为1.20(60 ℃测)的浸膏,备用;黄狗肾药渣与方中其他饮片加10倍量水煎煮2次,每次2 h,滤过,合并滤液,浓缩至相对密度1.15(80 ℃测),加乙醇至含量为60%,静置48 h,抽滤,滤液与黄狗肾液合并回收乙醇至尽,再与枸杞子、茯苓提取液合并即得。

  工艺B提取液:按处方比例称取饮片,黄狗肾加10倍量70%乙醇回流提取2次,每次1 h,滤过,药液与药渣备用;其余6味饮片的处理同工艺A。阳性对照液:取六味地黄丸捣碎,研成粉状,然后加入蒸馏水混溶,即得。阴性对照液:按处方比例称取饮片(缺黄狗肾),饮片的处理同工艺A。

  2.2 对幼鼠子宫、卵巢发育的影响

  取未成熟ICR健康雌性幼鼠(体重14~18 g)60只,随机分为空白对照组(灌胃等量生理盐水)、阳性对照组(4.5 g/kg)、工艺A组(16.5 g/kg)、工艺B组(16.5 g/kg)、阴性对照组(16.5 g/kg)。各组均灌胃给予相应药物,剂量0.2 mL/10 g, 1次/d×10 d。末次给药后12 h,脱颈椎处死,解剖,取子宫、卵巢、脾、胸腺,分离脂肪,迅速以电子天平称重。计算脾、胸腺、卵巢、子宫系数 [2]。结果表明,工艺A组促进子宫、卵巢和胸腺生长,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示工艺A组具有促进子宫、卵巢发育的作用。

  2.3 对卵巢摘除大鼠雌激素活性的影响

  取雌性SD大鼠85只,除正常对照组10只外,其余75只去除双侧卵巢,手术后2周,将手术成功的大鼠随机分组,每组10只。各组按下述剂量每日灌胃给予相应药物1次,正常对照组和模型组:等量生理盐水;阳性对照组:3 g/kg六味地黄丸;工艺A组:11 g/kg;工艺B组:11 g/kg;阴性对照组:11 g/kg。每日灌胃1次,连续给药4周。末次给药30 min后,每鼠阴道内缓缓注入新鲜配制的25 mg/mL TTC水溶液0.1 mL,于阴道内停留30 min,取血,离心,取血清测E2、FSH、LH水平。立即处死,剪取大鼠阴道,纵行切开,分离阴道,剪碎后置离心试管中,加入无水乙醇和四氯乙烯混合溶液4 mL,浸泡提取2 h, 2 000 r/min离心5 min。吸取上清液,以无水乙醇和四氯乙烯混合液作空白对照,于490 nm处测定A值[2-4]。

  结果表明,工艺A组和工艺B组均可使卵巢摘除大鼠血清E2水平增高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。提示工艺A组和工艺B组具有调节机体激素水平的作用。工艺A组的OD值与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),提示工艺A组可明显增加大鼠阴道角化上皮细胞,具有提高雌激素活性的作用。

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